猪轮状病毒病有什么临床症状?防控措施有哪些?
猪轮状病毒病是由猪轮状病毒(porcine rotavirus,PoRV)引起的一种以腹泻、呕吐、厌食、脱水为临床症状的急性胃肠炎传染病。猪轮状病毒是导致世界范围内仔猪剧烈腹泻的主要病原之一,给全球养猪业造成巨大的经济损失。猪轮状病毒感染具有潜伏期短、传染性强、流行范围广、发病率高等特征,常与其他细菌、病毒混合感染而使病情加重,导致患病猪群死亡率升高,是我们养猪人需要重点关注的病原之一。
01病原学特点
猪轮状病毒是导致仔猪严重腹泻的主要病原之一,属于呼肠孤病毒科(Reoviridae),轮状病毒属(Rotavirus)。猪轮状病毒粒子没有囊膜结构,形状类似球形,呈20面体对称结构,在电镜观察下病毒颗粒直径约为70nm,有三种蛋白质衣壳:核衣壳、内衣壳和外衣壳。外衣壳包裹着内衣壳,它是由厚度约20nm的光滑薄膜组成,形成了轮状病毒特有的车轮状特征,因此根据其特征将其命名为轮状病毒。
猪轮状病毒全基因组长约18522bp,由11节段的双股RNA(16~21 kb)组成,分别编码6种结构蛋白(VP1~VP4、VP6和VP7)和5种非结构蛋白(NSP1~NSP5),其中,VP1~VP3为髓芯蛋白;VP4、VP7为外衣壳蛋白,共同构成轮状病毒的外层衣壳结构蛋白,VP7为糖蛋白,VP4为非糖基化蛋白,VP4经胰蛋白酶裂解可产生具有增强病毒感染性的VP5和VP8,对病毒的传染性至关重要;VP6构成中间一层衣壳,决定了血清群的特异性,是最重要的免疫原性蛋白。
轮状病毒具有不同的血清群和血清型,根据VP6分为7个抗原性存在差异的血清群。猪轮状病毒已被证实至少有五个血清群(A、B、C、E和H)可以感染猪。其中血清A型是引起断奶前后仔猪腹泻最常见的亚型,在由PoRV引起商品化猪群的腹泻病中占90%以上。根据vp7和vp4抗原分型,又可分为G和P型,其中G型有27个血清型,P型有37个血清型。
02流行特点
2.1传染源
病猪、隐性感染猪及带毒猪是本病的传染源。由于后两者不易被发现,因而起着重要的传染源作用。人和动物主要通过直接接触或间接接触感染者及被污染的饮水、饲料等感染。
2.2传播途径
猪轮状病毒主要存在于患病猪或带毒猪的消化道内,随粪便排出体外,经粪-口途径引起传播和流行。有证据表明PoRV可以通过呼吸道分泌物传播,但是不能通过呼吸道传播。
2.3易感动物
本病的易感动物较多,猪、牛、羊、马等都具有易感性,本病毒甚至可以感染人,造成人的发病。不同年龄阶段的猪均可感染,但临床上以2月龄以内仔猪症状最为明显、病死率高达95%,随着日龄增长抵抗力逐渐增强,中大猪具有较强的耐过性,临床上多呈隐性感染过程,妊娠猪感染后可经胎盘传染给仔猪。轮状病毒以气温偏低的初春、秋冬季较为高发,但如今轮状病毒感染的季节性已经不是很明显,呈常年发病,且发病猪只极易产生多种继发或并发感染,临床上使用抗菌素治疗往往难以奏效。
2.4流行情况
目前,在临床当中,PoRV的检出率有抬头趋势。华中农大肖少波教授团队对全国29省市自治区进行猪轮状病毒阳性率统计,全国PoRV的流行率达到42%左右,其中华北地区的流行率最高,达47.69%。并且,其中半数以上猪场都是先发生轮状病毒感染,然后再诱发PEDV,导致猪场仔猪病死率快速上升。此外,对检测的PoRV进行基因测序发现,目前,我国猪群中轮状病毒呈现多血清型(G9/G5/G4)同时流行,这也进一步增加了防控PoRV的难度。
03临床症状
本病多见于60日龄以内仔猪,仔猪发病后,出现精神不振,食欲下降的情况,而后出现严重的呕以及腹泻症状。刚开始发生腹泻的仔猪粪便呈粥样,随着病情的发展,粪便不断变稀,最后呈现水样粪便,在粪便中含有大量的凝乳块且具有恶臭气味。通常在1周龄以内的仔猪在发病后的3~7d就会出现明显的脱水症状,体重因此可减轻30%,病死率较高。2周龄以后仔猪感染发病时,则病死率较低,但会导致仔猪体质下降,使得发病猪变成僵猪。如果仔猪在发生本病的同时,周围环境温度过低或者出现细菌性的继发感染,仔猪的病死率会直线升高。成年猪和母猪在发生本病时多不表现出临床症状,或者仅表现出轻微的食欲下降和粪便呈粥样,有时还可见有个别病猪出现呕吐。病猪常经过4~5d的时间就会自行恢复,不出现死亡情况。
04诊断方法
由于猪轮状病毒病在临床症状上与猪流行性腹泻病、传染性胃肠炎、仔猪大肠杆菌病、仔猪冠状病毒病等有较多相似症状,所以本病很难通过症状鉴别诊断,只能以实验室检测为准。在腹泻开始24h内采取小肠及其内容物或者粪便,可以对病毒或抗体进行检测。目前该病常用的实验室诊断方法包括病毒分离鉴定、RT-PCR技术、免疫荧光技术、酶联免疫吸附试验、胶体金免疫技术等检测方法。
05防控措施
5.1做好生物安全,强化饲养管理
生物安全和生产流程管理是猪场疫病防控的基础,如果猪场这两面的工作没做到位,就会增加猪轮状病毒病发生和流行的风险。对于PoRV的防控,猪场必须采取更有效的措施,减少环境(特别是产房)病毒载量。猪场应加强猪群健康管理,适当保健,提高猪群健康度。产房严格全进全出,空栏彻底清扫、彻底消毒,避免猪群密度过大,发现病猪,要立即隔离到清洁、干燥和温暖的猪舍,并加强护理,尽量减少应激因素。
5.2药物治疗
现在还没有用于医治猪轮状病毒的特效药物,一旦发病,应采取对症治疗的措施。为了避免病猪出现细菌病继发感染,可进行抗生素注射。病猪由于腹泻而脱水,在治疗的同时要加强护理,提供充足的饮水,在饮水中加入电解多维、口服补液盐、阿莫西林可溶性粉(或新霉素可溶性粉)四黄止痢颗粒和一些营养成分并停止哺乳或喂料。轻症的可以在饲料中加入胃肠黏膜保护剂和莲矾散、蒙脱石粉。吐泻较重时用止吐剂及镇静剂,避免脱水及酸中毒。
5.3疫苗预防
疫苗免疫是防治病毒性疾病的最佳手段,有成本低防控效果好的优势。目前猪轮状病毒的流行血清型已经发生了明显变化,从原来以G5型为主演化成G9型为主,G9型的占比达80%以上,同时存在G5、G4等多血清型。现有的猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻、猪轮状病毒三联活疫苗中猪轮状病毒疫苗的血清型仍然是G5型,轮状病毒不同血清型之间几乎没有交叉保护,已经无法针对目前的猪轮状病毒流行毒株产生有效的预防效果。因此,科研院校、疫苗公司要加大新型多价轮状病毒的研制。当前轮状病毒多和猪流行性腹泻混合感染,猪流行性腹泻的危害更严重,猪场要重点做好猪流行性腹泻的防控。
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- 如何搞定猪口蹄疫?掌握病毒特性,学会快速诊断 来源: 猪业科学 猪口蹄疫是由猪口蹄疫病毒引起的一种急性、热性、高度接触性传染病,主要感染偶蹄动物,包括猪、牛、羊等,该病传播迅速,发病率高,可造成猪的蹄部、口腔、乳房等部位出现水疱和溃烂,严重影响猪的生长发育、繁殖性能,仔猪一旦感染猪口蹄疫,在还没有明显临床症状时,即会死亡,死亡率能够达到100%,给养猪业带来巨大的经济损失。此外,猪口蹄疫病毒还存在多个血清型和亚型,抗原变异性强,这使得猪口蹄疫的防控工作面临巨大挑战。因此,深入了解猪口蹄疫病毒特性,掌握快速准确的诊断方法,并制定科学有效的紧急防控措施,对于预防和控制猪口蹄疫疫情至关重要。 1、猪口蹄疫病毒特性 1.1形态结构 猪口蹄疫病毒属于微RNA病毒科口蹄疫病毒属,病毒粒子呈球形或六角形,无囊膜,直径约为20~25 nm;病毒衣壳由60个相同的蛋白质亚基组成,这些亚基围绕中心轴按五重、三重和两重对称轴排列,形成二十面体对称结构;病毒衣壳蛋白主要包括VP1、VP2、VP3和VP4四种结构蛋白,其中VP1是病毒的主要抗原蛋白,与病毒的免疫原性和细胞受体结合密切相关,也是诱导机体产生中和抗体的关键蛋白。 1.2理化性质 猪口蹄疫病毒对环境因素较为敏感,病毒在pH为6.5~7.5的环境中相对稳定,当pH低于3.0或高于9.0时,病毒会迅速失去感染性;该病毒对高温敏感,56℃30 min、60℃15 min即可将其灭活,但在低温条件下,病毒可长期存活,如在-60℃至-20℃环境中,病毒可存活数年,此外,猪口蹄疫病毒对脂溶剂(如乙醚、氯仿)不敏感,但对氧化剂(如过氧乙酸、次氯酸钠)、酸类(如柠檬酸)和碱类(如氢氧化钠)等消毒剂较为敏感。 1.3基因组特征 猪口蹄疫病毒的基因组为单股正链RNA,全长约8.5 kb,基因组由5'非编码区(5'UTR)、开放阅读框(ORF)和3'非编码区(3'UTR)组成,其中5'UTR含有大量的二级结构,对病毒的复制和翻译起调控作用;ORF编码一个多聚蛋白,该多聚蛋白在病毒蛋白酶的作用下裂解为多个成熟的蛋白,包括结构蛋白VP1-VP4和非结构蛋白2A-2C、3A-3D等,这些蛋白在病毒的复制、装配、感染过程中发挥重要作用;3'UTR主要参与病毒RNA的稳定性和复制起始。 1.4血清型分布 猪口蹄疫病毒共有7个血清型,分别为A、O、C、Asia1、SAT1、SAT2和SAT3,各血清型之间无交叉免疫保护,在猪口蹄疫的流行中,O型、A型和Asia1型是较为常见的血清型,其中O型口蹄疫病毒在全球范围内广泛流行,对养猪业危害最大,不同血清型病毒的抗原性和致病力存在差异,这也增加了疫苗研发和防控工作的难度。 2、猪口蹄疫的快速诊断方法 2.1免疫学诊断方法 2.1.1酶联免疫吸附试验(ELISA) ELISA是目前猪口蹄疫诊断中应用最广泛的免疫学方法之一,该方法利用抗原-抗体特异性结合的原理,通过酶标记物催化底物显色来检测样品中的抗原或抗体,根据检测目的的不同,ELISA可分为间接ELISA、竞争ELISA和夹心ELISA等。间接ELISA主要用于检测猪血清中的猪口蹄疫病毒抗体,可评估猪群的免疫状态;竞争ELISA则常用于检测猪口蹄疫病毒抗原,能够快速准确地诊断发病猪。ELISA具有灵敏度高、特异性强、可批量检测等优点,但也存在检测时间较长(一般需要2~3 h)、需要专业仪器设备等缺点。 2.1.2免疫胶体金技术 免疫胶体金技术是一种基于胶体金标记的免疫诊断技术,该技术将胶体金与特异性抗体结合,形成金标抗体,当金标抗体与样品中的抗原结合时,会在检测膜上形成肉眼可见的红色条带。免疫胶体金试纸条具有操作简便、快速(10~15 min即可出结果)、无需专业仪器设备等优点,适合在基层养殖场和现场快速筛查猪口蹄疫,但该方法的灵敏度相对较低,容易出现假阴性结果,因此常作为初步筛查方法,对于阳性样品还需进一步采用其他方法进行确诊。 2.2分子生物学诊断方法 2.2.1实时荧光定量PCR 实时荧光定量PCR是一种基于核酸扩增的定量检测技术,该技术在PCR反应体系中加入荧光探针,当PCR扩增过程中探针与目标DNA结合时,荧光信号会随着PCR产物的增加而增强,通过检测荧光信号的强度可以实时监测PCR反应进程,并对样品中的病毒核酸进行定量分析。实时荧光定量PCR具有灵敏度高、特异性强、检测速度快(1~2 h)等优点,能够在病毒感染早期检测到病毒核酸,是目前猪口蹄疫病原检测的常用方法之一,但该方法对实验室条件和操作人员技术要求较高,且检测成本相对较高。 2.2.2等温扩增技术 等温扩增技术是一类在恒温条件下进行核酸扩增的技术,主要包括环介导等温扩增技术(LAMP)、重组酶聚合酶扩增技术(RPA)等,以LAMP为例,该技术利用4~6条特异性引物,在Bst DNA聚合酶的作用下,在60~65℃恒温条件下对目标核酸进行快速扩增,通过观察反应体系中荧光信号或白色沉淀的产生来判断结果。等温扩增技术具有操作简便、反应速度快(30~60 min)、对仪器设备要求低等优点,适合在基层实验室和现场快速检测猪口蹄疫病毒。 3、猪口蹄疫的紧急防控措施 3.1疫情报告与应急响应 一旦发现猪出现口蹄疫疑似症状,养殖场(户)应立即向当地动物防疫监督机构报告,动物防疫监督机构接到报告后,应迅速组织专业技术人员进行现场诊断,初步怀疑为猪口蹄疫疫情的,要及时采集病料送检,确诊后立即启动相应的应急预案;各级政府和相关部门应按照应急预案要求,明确职责分工,迅速开展疫情防控工作,包括成立应急指挥机构、调配防控物资、组织人员培训等。 3.2隔离封锁 对发生疫情的养殖场(户)及周边一定范围内的区域进行严格隔离封锁,设置警示标志,禁止人员、车辆和动物随意出入封锁区;对封锁区内的猪只进行全面排查,将发病猪与健康猪进行隔离饲养,防止疫情进一步扩散,同时,对封锁区内的道路、圈舍、用具等进行严格消毒,切断病毒传播途径。 3.3扑杀与无害化处理 对于确诊感染猪口蹄疫的猪只及同群猪,应在严格的生物安全措施下进行扑杀,扑杀方式可采用电击、窒息等人道方式,避免病毒扩散。扑杀后的猪尸体及污染物必须进行无害化处理,常见的无害化处理方法包括焚烧、深埋、化制等,在进行无害化处理时,要严格按照相关操作规程进行,防止环境污染和疫病传播。 3.4消毒与净化 对疫情发生场所及周边环境进行全面彻底的消毒,可选用过氧乙酸、氢氧化钠、次氯酸钠等消毒剂,对圈舍、场地、车辆、用具等进行喷雾消毒、浸泡消毒或熏蒸消毒;同时,对疫区内的水源、饲料等进行检测和处理,确保其安全卫生;在疫情扑灭后,要对疫区进行全面的净化,经过一段时间的观察和检测,确认无病毒存在后,方可解除封锁。 3.5紧急免疫接种 对受威胁区的猪只进行紧急免疫接种,接种人员应根据猪年龄、免疫状态、体质量情况等确定所选疫苗接种剂量合理性,选择与当地流行血清型相匹配的猪口蹄疫疫苗,按照疫苗使用说明进行接种;紧急免疫接种应在疫情发生后的最短时间内完成,以提高猪群的免疫力,降低感染风险,同时,要加强对免疫猪群的监测,评估免疫效果,及时发现和处理免疫失败的情况。 4、结语 猪口蹄疫病毒独特的特性决定了其传播和致病特点;快速准确的诊断方法是及时发现和控制猪口蹄疫疫情的关键;科学合理的紧急防控措施是控制猪口蹄疫疫情的重要保障,只有深入了解猪口蹄疫病毒特性,掌握快速准确的诊断方法,并制定科学有效的紧急防控措施,才能够有效控制疫情的扩散和蔓延,减少养猪业的经济损失。未来,还需要进一步加强对猪口蹄疫病毒的研究,不断优化诊断技术和防控策略,为养猪业的健康可持续发展提供有力支持。
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